Product classification
植物血球凝集素
冰凍切片包埋劑
細胞凋亡檢測試劑盒POD法
TEV蛋白酶
基質基底膜
實驗室自產產品
堿基、核酸及其衍生物
氨基酸及蛋白質
酶和輔酶
維生素
抗生素
染色劑
碳水化和物
培養基
其他生化試劑
Relevant Articles
pCold-SUMO 原核蛋白表達試劑盒
原核蛋白表達試劑盒簡介 【* 4000/盒 】
本試劑盒所包含的原核表達載體（pCold-SUMO）是在pCold載體基礎上改造而成（Solarbio ），該載體啟動子（CS Promoter）來源于南極嗜冷細菌
，在低溫下（15度）才能啟動蛋白的表達。低溫下細菌生長緩慢，使得蛋白合成速度減慢，從而大限度的提高了蛋白正確折疊的幾率，提
高了蛋白可溶性表達，增強了活性蛋白的表達比率。該表達系統所包含的SUMO tag可以極大地提高小分子量蛋白的表達量，而且進一步提
高了蛋白的可溶表達幾率。同時，試劑盒配備的SUMO Protease（含6×His標簽）可特異性去除SUMO tag，從而得到不含任何標簽的重組蛋白。
原核蛋白表達試劑盒操作方法
I. 重組質粒構建
1.根據目的基因選擇合適的酶切位點，將pCold-SUMO載體和插入片段分別進行雙酶切
2.酶切完成后 經1％瓊脂糖凝膠電泳，將線性載體進行凝膠回收（Solarbio, D1200） 。
3.連接反應（以SolarbioT4連接酶為例）
4.取5 μl連接產物轉入*0 感受態細胞（Solrbio ,C1200） ，通過測序鑒定重組質粒。
II. 重組蛋白表達
1. 將重組質粒轉入表達宿主菌ArcticExpress或BL21（DE3）、BL21（DE3）plys、Origami等感受態細胞）。
2. 挑選生長良好的菌落，接入LB培養基（含40-100ug/ml氨芐青霉素），37℃劇烈振蕩培養至OD600=0.2-0.6。
4. 待培養基冷卻至15℃后，再靜置30min。
5. 加入適量IPTG（0.1-1 mM）,15℃振蕩培養24h。
6. 4,000 rpm室溫離心15min，收集細胞。
7. 用重懸液重懸細胞（含PMSF或Protease Inhibitor Cocktail），并置于冰上破碎。
8. 破碎后使用SDS-PAGE膠檢測蛋白的表達及可溶性表達情況。
III. 蛋白純化
1.融合SUOM標簽的重組蛋白含有6×His標簽，重組蛋白可通過Ni-NTA Resin（Solarbio, C0401）進行純化。詳細的純化操作步驟請參考Solrbio Ni-NTA
Resin（Solarbio ，C0401）說明書。
2.SUMO標簽分子量為15KD。融合SUOM標簽的重組蛋白可通過SUMO Protease切割去處SUMO標簽，SUMO Protease切割位點見圖譜。切割后
SUMO標簽含6×His標簽、目的蛋白不含有6×His標簽，所以可通過Ni-NTA Resin（Solarbio, C0401） 將SUMO標簽和未*切割的融合蛋白
與不含SUMO標簽的目的蛋白分離純化。
3.本SUMO Protease蛋白分子量為31KD,并含有6×His標簽可通過Ni-NTA Resin去除。
注意：對于大部分融合蛋白，SUMO Protease的理想反應液中的NaCl濃度為150mM。然而，根據實際情況可在100 mM～300 mM之間調節NaCl
的濃度以達到佳效果。若蛋白為熱不穩定性，請在4°C孵育較長時間或增加酶的用量。
（2）. 混勻上述體系后于30°C 孵育，在1、2、4、6小時分別吸出30 μl上述反應液，分別置于EP管中。
（3）. 向上述EP管中加入6 μl 5XSDS Loading Buffer，置于-20°C。
（4）. 取30 μl樣品進行SDA-PAGE 分析。
原核蛋白表達試劑盒
上海索萊寶生物科技有限公司Shanghai solarbio Bioscience & Technology Co.,LTD 上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產分子生物學產品為一體，并能提供的專業性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨”的發展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。 公司組織結構清晰，內部管理科學，擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍，保持了各個部門之間的高效合作運轉，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作，目前公司已經和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企業結成緊密的合作伙伴關系，代理其世界的*產品，并在全國各地設有分銷機構。 我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高品質的產品和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業的服務！ 原核蛋白表達試劑盒歡迎新老顧客前來詢問
公司名稱：
上海索萊寶生物科技有限公司
公司地址：
徐匯區欽江路15號1405
郵政編碼：
200233
：
86-/86-
電子郵件：
solarbio
公司：
http://m.027wst.com http://bioing.biogo.net/
聯 系 人：
馬 （）
部門（職位）：
銷售 （）
